商品屬性:
貨號(hào) |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
A-PJ1167-50T |
50T |
15min高產(chǎn)全血基因組DNA提取試劑盒 |
儲(chǔ)存條件:
15min高產(chǎn)全血基因組DNA提取試劑盒保質(zhì)期為 2 年。
產(chǎn)品介紹:
該試劑盒采用獨(dú)特的裂解液,可快速可靠的從抗凝全血樣本中純化出高純度的基因組 DNA,*大限度的去除蛋白、色素、脂類(lèi)等雜質(zhì)污染。應(yīng)用本試劑盒獲取的 DNA純度高,無(wú)抑制劑,A260/A280 為 1.6-1.9。應(yīng)用本試劑盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反應(yīng)、PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern 雜交等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
(1) 本試劑盒中的 Washing Buffer 中已經(jīng)加乙醇,無(wú)需單獨(dú)添加。
(2)gDNA LB1,儲(chǔ)存時(shí)可能會(huì)有白色結(jié)晶沉淀,放置于56℃水浴鍋溶解后,不影響使用效果。
(3)蛋白酶 K(20 mg/ml)長(zhǎng)期保存請(qǐng)儲(chǔ)存于-20℃,短期室溫保存(6 個(gè)月),其它組分儲(chǔ)存于室溫。
操作方法
(1)樣本處理(1.5 或 2 ml EP 管中處理)人抗凝全血:吸取 0.2~0.8 ml 抗凝全血加入到 800 μl 紅細(xì)胞裂解液中上下顛倒混合均勻,13000rpm 離心 30s,去上清,留白細(xì)胞沉淀,用 50 μl 水重懸白細(xì)胞沉淀(有少量紅細(xì)胞殘留并不影響 DNA 的產(chǎn)量,如仍然有大量紅細(xì)胞未裂解,可再次用紅細(xì)胞裂解液將紅細(xì)胞裂解)。**細(xì)胞分離液分離出的白細(xì)胞:直接吸取 50~80 μl 白細(xì)胞。有核紅細(xì)胞抗凝全血(禽血):吸取 10 μl 抗凝全血加入到50 μl 無(wú)菌水中,漩渦震蕩混合均勻。
(2)向上述準(zhǔn)備好的樣品溶液中加入 100 μl gDNA LB1 和20 μl 蛋白酶 K 漩渦混合均勻 10s,56℃水浴鍋中消化5~30min(長(zhǎng)時(shí)間消化可提高 DNA 的產(chǎn)量)。
(3)加入 700 μl gDNA BB2 漩渦震蕩混合均勻 1min,肉眼觀察有無(wú)未溶解的血凝塊,如果無(wú)血凝塊,則直接倒入到吸附柱中,13000rpm 離心 1min。注意:如果有未溶解的血凝塊,則短離心去除血凝塊后,再倒入到吸附柱中,進(jìn)行后續(xù)離心操作。
(5)倒掉廢液,向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer,13000rpm 離心 15s。重復(fù)此步驟一次。
(6)將吸附柱重新放回離心機(jī),13000rpm 空離心 2min,將殘留的乙醇徹底甩干。
(7)將吸附柱芯放入到 1.5ml 收集管中,向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer(DNA Elution Buffer 預(yù)熱到 65℃將提高洗脫產(chǎn)量),室溫放置 1min,13,000rpm 離心1min,洗脫液即為基因組 DNA,冷凍保存。
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