實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在**上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,產(chǎn)品僅用于科研是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 |
乙醇脫氫酶1抗體100ul |
英文名稱 |
Anti-AKR1A1 |
貨號(hào) |
K210078 |
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
抗體的制備過(guò)程:
1. 原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
抗體的多樣性:
抗體的異質(zhì)性。抗體的組成極為復(fù)雜,是由成千上萬(wàn)、多種多樣的球蛋白(Ig)分子所組成。這些Ig分子在形狀、大小、結(jié)構(gòu)以及氨基酸的組成和排列上,既相似,又有差別。由于有差別,它們的電泳活性就有很大的變化。
因?yàn)榭贵w具有與抗原決定簇相對(duì)應(yīng)的結(jié)合部位(抗原結(jié)合簇),所以抗體與抗原的結(jié)合具有特異性。另一方面,抗體本身是一種蛋白質(zhì),具有本身的氨基酸組成、排列和立體結(jié)構(gòu),對(duì)異種動(dòng)物來(lái)說(shuō),它又是抗原。各類Ig都具有可用血清學(xué)方法檢出的抗原特異性,它們表現(xiàn)出不同的血清學(xué)類型。
一抗和二抗的區(qū)別:
抗體就是平常所說(shuō)的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。
抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測(cè)抗體的存在。
一抗是針對(duì)抗原的抗體,二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說(shuō),抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體系統(tǒng)產(chǎn)生應(yīng)答,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。
一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗)。
一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識(shí)別出我們想要檢測(cè)的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來(lái)的。
二抗:可以和一抗結(jié)合,并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),作用是檢測(cè)一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),則不需要二抗。但這樣成本很高,因?yàn)橐环N一抗只識(shí)別一種底物。所以如今的設(shè)計(jì)一般是二抗帶上可檢測(cè)標(biāo)記,再來(lái)檢測(cè)一抗。而一抗識(shí)別底物。這樣,當(dāng)一抗結(jié)合到底物上,就可以通過(guò)二抗檢測(cè)出來(lái)。
Bcl2 alpha蛋白抗體英文全稱Human protein-arginine deiminase type-4英文簡(jiǎn)稱PADI4檢測(cè)范圍1172nmol/L-10ng/ml
B細(xì)胞轉(zhuǎn)錄激活因子抗體英文全稱citrullinated antithrombin英文簡(jiǎn)稱cAT檢測(cè)范圍1173nmol/L-120U/mL
腦鈉通道蛋白1抗體英文全稱soluble vascular endothelial growth factor英文簡(jiǎn)稱SVEGF檢測(cè)范圍1174nmol/L-800pg/ml
10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體英文全稱Vascular Endothelial cell Growth Factor165英文簡(jiǎn)稱VEGF165b檢測(cè)范圍1175nmol/L-800pg/ml
磷酸化鈣調(diào)磷酸酶B亞基B1抗體英文全稱Rab-11A英文簡(jiǎn)稱Rab-11A檢測(cè)范圍1176nmol/L-20ng/ml
羊毛甾醇14α-去甲基化酶蛋白抗體英文全稱Der p IgG4英文簡(jiǎn)稱Der p IgG4檢測(cè)范圍1177nmol/L-400ng/ml
7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體英文全稱TSH alpha subunit英文簡(jiǎn)稱TSHαsb檢測(cè)范圍1178nmol/L-200ng/ml
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體英文全稱FAT tumor suppressor homolog 1英文簡(jiǎn)稱FAT1檢測(cè)范圍1179nmol/L-16ng/ml
細(xì)胞角蛋白16抗體英文全稱Testosterone Recipient英文簡(jiǎn)稱TR檢測(cè)范圍1180nmol/L-100ng/ml
細(xì)胞分裂周期蛋白5樣蛋白抗體英文全稱Treponema pallidum英文簡(jiǎn)稱TPI檢測(cè)范圍1181nmol/L-
鈣粘蛋白23抗體英文全稱Recombinant Nuclear Receptor Related Protein 1英文簡(jiǎn)稱NURR1檢測(cè)范圍1182nmol/L-20ng/ml
細(xì)胞色素p450 2s1抗體英文全稱Plasminogen activator inhibitor type 1英文簡(jiǎn)稱PAIT1檢測(cè)范圍1183nmol/L-20ng/ml
c-fos抗體英文全稱polymeric immunoglobulin receptor英文簡(jiǎn)稱PIGR檢測(cè)范圍1184nmol/L-40ng/ml
6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框146抗體英文全稱Netrin-4英文簡(jiǎn)稱Netrin-4檢測(cè)范圍1185nmol/L-2000pg/ml
6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框154抗體英文全稱anti-paternal cytotoxic antibody英文簡(jiǎn)稱APCA檢測(cè)范圍1186nmol/L-16ng/mL
補(bǔ)體C5抗體英文全稱Hantaan virus antibody IgM英文簡(jiǎn)稱HVIgM檢測(cè)范圍1187nmol/L-12ng/mL
乙醇脫氫酶1抗體100ulγ-環(huán)糊精標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Gamma Cyclodextrin -
加拉碘銨標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Gallamine Triethiodide
氫溴加蘭他敏標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Galantamine Hydrobromide
吡喃葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Galactose
D-基半乳糖鹽鹽標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Galactosamine Hydrochloride -
半乳糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Galactitol
釓弗塞標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Gadoversetamide
釓特醇標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Gadoteridol
釓噴單葡甲標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Gadopentetate Monomeglumine
釓雙標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Gadodiamide
加巴噴丁標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Gabapentin
呋塞米標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Furosemide
標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Furazolidone
富馬標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Fumaric Acid
氟維司群標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Fulvestrant