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細胞貼壁促進方法流程
日期:2024-12-12 11:13
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摘要:
細胞貼壁促進方法流程:
1. 適度消化細胞:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
2. 用塑料瓶培養(yǎng),如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養(yǎng)瓶,或者用鹽酸對培養(yǎng)瓶進行蝕刻,或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA,也可以幫助細胞貼附新的培養(yǎng)瓶,細胞不易貼壁,建議加多聚賴氨酸處理。
3. 正確配制消化液或培養(yǎng)液。
4. 使用合適的細胞外基...
細胞貼壁促進方法流程:
1. 適度消化細胞:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
2. 用塑料瓶培養(yǎng),如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養(yǎng)瓶,或者用鹽酸對培養(yǎng)瓶進行蝕刻,或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA,也可以幫助細胞貼附新的培養(yǎng)瓶,細胞不易貼壁,建議加多聚賴氨酸處理。
3. 正確配制消化液或培養(yǎng)液。
4. 使用合適的細胞外基質(zhì)或貼壁試劑。
5. 復(fù)蘇新的細胞,第1周用20%血清幫助細胞復(fù)原。
6. 傳代接種一定要鋪的均勻,避免細胞抱團生長。
7. 細胞傳代24小時之內(nèi),不要晃動,以免影響貼壁。
8. 體內(nèi)上皮細胞生長在膠原構(gòu)成的基膜上,因此培養(yǎng)在有膠原的底物上有利于生長。人或小鼠表皮細胞培養(yǎng),可以用γ射線照射后的3T3細胞為飼養(yǎng)層,另外降低pH、Ca2+含量和溫度,均有利于上皮細胞生長。