ELISA試驗(yàn)顯色淡,靈敏度偏低結(jié)果分析
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。除了盒子本身質(zhì)量外,操作中很多因素都影響試驗(yàn)的正常結(jié)果。常出現(xiàn)的問(wèn)題是顯色淡,靈敏度偏低。下面詳細(xì)分析:
1、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高;所以盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。
2、試劑盒未充分平衡;所以試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。
3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃,應(yīng)注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。
4、保溫時(shí)間不足;所以做實(shí)驗(yàn)時(shí)一定注意時(shí)間的重要性,如果怕忘了時(shí)間,可以校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)。
5、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加;按說(shuō)明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)
6、移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔;所以保證校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用。
7、蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題,要使用新鮮合格的蒸餾水。