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哪些是qPCR探針設(shè)計(jì)的一般原則

日期:2025-01-07 10:27
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摘要: 哪些是qPCR探針設(shè)計(jì)的一般原則: 1、擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度不應(yīng)太大,一般小于300bp。 2、探針不能和任一引物互補(bǔ),且其長(zhǎng)度在保證特異性的前提下盡可能的短,長(zhǎng)度不要超過30bp。 3、探針的Tm值至少比引物的Tm值高5度 4、探針如用于檢測(cè)多態(tài)位點(diǎn),多態(tài)位點(diǎn)應(yīng)盡可能靠近探針中部 5、探針5’端不能是堿基G,G對(duì)熒光基團(tuán)有猝滅作用。

哪些是qPCR探針設(shè)計(jì)的一般原則:

1、擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度不應(yīng)太大,一般小于300bp。

2、探針不能和任一引物互補(bǔ),且其長(zhǎng)度在保證特異性的前提下盡可能的短,長(zhǎng)度不要超過30bp。

3、探針的Tm值至少比引物的Tm值高5度

4、探針如用于檢測(cè)多態(tài)位點(diǎn),多態(tài)位點(diǎn)應(yīng)盡可能靠近探針中部

5、探針5’端不能是堿基G,G對(duì)熒光基團(tuán)有猝滅作用。